前言序：分子生物学以实验
技术为主体，是生命科学发展中最重要的前沿学科。分子生物学实验技术
正深刻地影响着
医学的各个分支领域。因此，掌握分子生物学技术的
基础理论和实验基本方
法对医学生而言十分重要。
编写一本适合医学生使用的实验
教材是我们面临的新课题。本书是在实验
指导讲义(供北华
大学医学、
检验、预防、
药学等专业科生使用)的基础上，增加了分子生物学的相关理论与
技术，如流式细胞术的原理与作用、STR的检测方法、DNA多态性
分析、流式细胞术检测细胞
周期及DNA倍体分析等，经修订和改编而形成的。这本《
医学分子生物学实验指导》主要适
用于检验医学的
临床医学本科生，但其中一些综合性实验对临床检验
诊断学硕士研究生及从
事分子生物学方面研究的教科研人员来讲，也可作为分子生物学实验技术的教学参考书。
本书编写的宗旨是简明、
实用。全书体例框架分三大模块。第一模块是扼要地介绍分子生物
学技术的基础理论。主要包括八大技术：核酸分离与纯化、蛋白质分离与纯化、电泳、核酸
分子杂交、放射性自显影、PCR、生物芯片及流式细胞术。第二模块是分子生物学实验的基
本方法。主要编写了分子生物学的基本实验和常用方法。为加强学生的动手能力，这部分详
细地介绍了实验原理、试剂的配制、操作步骤及所需
仪器和
材料等。第三模块是附录部分。
主要内容包括：分子生物学实验中常用试剂的配制方法及常用
资料和参数等。此外，还有附
录中提供了分子生物学理论与实验的重要知识点，这将有助于学生对分子生物学技术有一个
相对全面的了解，以便加深理论与实践的结合。相信本书定能成为医学本科初学者的入门教
材，并能为以后的深造学习奠定实验基础，同时也能成为广大医学生了解分子生物学的良师
益友。
本书编者主要是本教研室(北华大学分子生物学教研室)工作在教学和科研第一线的中青年教
师。他们工作努力、认真编写、倾注了大量的心血才完成了各自承提的任务，在此表示衷心
的感谢!
由于我们的知识水平有限，书中难免有错误，不妥和疏漏之处，恳请同仁及广大读者在使用
的过程中予以指正赐教。
张吉林
2005年3月
作者简介：目录：第一部分分子生物学技术的基础理论
第一章核酸的分离制备(1)
一、核酸分离制备的总原则(1)
二、核酸提取的主要步骤(1)
三、制备核酸时应注意的问题(1)
四、核酸提取(2)
五、核酸沉淀(3)
六、核酸定量(4)
七、核酸保存(4)
第二章蛋白质的分离纯化(5)
一、蛋白质分离纯化的一般原则(5)
二、蛋白质分离纯化的主要方法(6)
三、蛋白质纯度鉴定与含量测定(9)
第三章电泳技术(10)
一、基本原理(10)
二、影响电泳迁移率的因素(10)
三、核酸电泳的指示剂与染色剂(11)
四、不同波长紫外线对EB-DNA复合物的影响(12
)
第四章核酸分子杂交(13)
一、基本原理(13)
二、探针的种类(13)
三、探针的标记方法(14)
四、核酸分子杂交的基本方法(15)
五、常见的放射性核素标记物的比较(16)
第五章放射自显影术(17)
一、放射自显影术的基本原理(17)
二、放射自显影的特点(17)
三、放射自显影的应用(18)
第六章PCR技术(19)
一、PCR技术的基本原理(19)
二、PCR主要相关技术(19)
三、PCR技术在医学中的主要应用(21)
第七章简介生物芯片技术(23)
一、基本概念(23)
二、检测的基本过程(23)
三、生物芯片的类型(23)
四、生物芯片技术在医学领域中的应用(25)
第八章流式细胞术(27)
第一节流式细胞术的基本原理(27)
第二节流式细胞仪的分类和基本构造(28)
第三节流式细胞仪的主要技术指标(38)
第四节流式细胞仪应用的技术要求(39)
第五节流式细胞仪在医学研究中的应用(46
)第二部分分子生物学实验的基本方法
实验一细菌的培养与收集(51)
实验二质粒DNA的提取(54)
实验三人外周血白细胞DNA的提取(59)
实验四哺乳动物细胞基因组DNA的提取(62)
实验五真核细胞总RNA的制备(65)
实验六真核细胞mRNA的提取(70)
实验七核酸的定量(73)
实验八DNA的限制性内切酶消化法(76)
实验九琼脂糖凝胶电泳法检测DNA(79)
实验十聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测DNA(81)
实验十一STR的检测方法(85)
实验十二低熔点琼脂糖凝胶回收DNA片段(88)
实验十三DNA分子的体外连接(90)
实验十四感受态细胞的制备及转化(93)
实验十五重组质粒的筛选(97)
实验十六SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的相对分子质量(
101)
实验十七等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点(105
)
实验十八Western印迹法检测表达蛋白(108)
实验十九免疫荧光法检测重组蛋白(114)
实验二十放射免疫沉淀法检测重组蛋白(117)
实验二十一RT-PCR-微孔板杂交-ELISA法检测基因表达(12
1)
实验二十二DNA片段的印迹杂交(125)
实验二十三RNA片段的印迹杂交(130)
实验二十四放射性核素32P随机引物延伸标记法(
136)
实验二十五光敏生物素标记DNA法(139)
实验二十六地高辛标记DNA探针(141)
实验二十七乙型肝炎病毒的检测方法(143)
实验二十八RT-PCR法检测HCVRNA(148)
实验二十九PCR-SSCP分析(152)
实验三十apoE多态性分析(157)
实验三十一凋亡细胞梯状条带电泳(161)
实验三十二流式细胞术检测细胞周期及DNA倍体分析(164
)
第三部分附录
附录一分子生物学实验中常用参数及试剂的配制(
167)
一、常见的市售酸碱(167)
二、常用的缓冲液(168)
三、常用酶的配制(173)
四、常用贮存液的配制(175)
五、杂交实验中封闭剂的配制与用途(178)
六、放射性核素数据(179)
七、常用
物理系数及分子量
标准(180)
八、细菌培养基和抗生素(183)
九、
中国汉族等位基因频率表(184)
附录二分子生物学的重要知识点(188)
一、名词理解(188)
二、简答题(196)
详细介绍：本书介绍了分子生物学技术的基础理论、医学分子生物学实验的基本方法及其在科学研究中
的应用。主要内容有核酸的分离制备、蛋白质的分离纯化、电泳技术、核酸分子杂交、放射
自显影术、PCR技术、生物芯片技术、流式细胞术的基础理论和实验技术。
本书主要读者对象为医学院校本科、七年制学生，也可作为硕士研究生、相关学科进修生和
教师的参考书。
书评：
