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RNA分离与鉴定实验指南-RNA研究方法 |
| 编 号： 168195 |
| 著 作 者： ［美］法雷尔(Farrell,RE,Jr)编 |
| 出 版 社：
化学工业出版社
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| 书 号： 9787502596255 |
| 出版日期： 2008-1-1 |
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市 场 价： ￥63 元 |
| 书 店 价： ￥59.9 元 |
| 立即节省： ￥3.2 元 |
| 人 气： |
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内容简介
为什么要研究RNA？1993年“RNAMethodologies”第1版付印时，就提出了这个问题。分离具有生物活性及化学稳定的RNA，始终是分子生物学的核心问题。尽管这种说法过去未必被人赏识，在今天却显得颇为恰当。但是，本书第2版出版后，很多方面发生了变化。人类基因组计划的完成，预示着以前不为人所知的功能基因组和蛋白质组的出现。现在研究者们经常探讨的都是转录组、蛋白质组、代谢组，还有就是唯恐被我们忘记了的基因组。
很明显，对组织特异性基因表达调控的研究，是个聚集了强烈兴趣的领域，而那些昂贵的印在尼龙滤膜或玻璃芯片上的微阵列测定，又给它加了一把火。但是，不管是这些
分析手段，还是基于
标准定量PCR之上的测试，都只能建立在从合适的生物
材料中分离到高质量RNA这一
基础之上。只有高质量的RNA，才能支持反转录或是其他研究其功能的辅助实验。同样在这儿值得一提的是，虽然微阵列
技术在当代研究工具中确已占有一席之地，但我们所说的那些“已被仔细检查过的序列”，所指的都是已被克隆的基因。微阵列技术并不能直接支持对以前未被鉴定的基因、不同剪接的转录物或多起始位点的转录物的检测和鉴定。
因此，作为基因表达的一个参数，对RNA的研究在很多实验室仍然是常用的。详细检查mRNA的生物合成，从RNA复杂性的精致控制观点出发，为细胞生物化学提供了一个独特的视角。结合那些传统的实验方法，不同的PCR不断提供不同灵敏度和分辨率的各种方法，以鉴定细胞内的转录活性。mRNA的生物合成、成熟和功能都受到转录及转录后的影响。它们一起构成了无数基因的调控点。因此，RNA的稳定性及其
加工过程，在细胞中显然起着中心的调控作用。
按照已有的科学基础规则，对RNA鉴定的方方面面，可以从始至终地组成一个连贯的整体。如何才能从至少一个方面对研究目标的基因表达调控给出较为明确的解释呢，从生物材料中纯化出高质量的RNA，就是其最为基本的起点。虽然与更新、更灵敏的方法相比，很多包括Northern分析在内的传统技术，已经失去了往日的光辉，但是，深思熟虑、应对有度的RNA分离技术，依然与随后的分析和操作具有同等重要的地位。是否能从细胞或组织中分离到RNA，唯有小心翼翼地处理，才能支撑后续的这些技术。
本实验指南不断收录了已经过测试和优化处理的实验室操作程序(实验方案)，主要涉及的是真核RNA的分离和鉴定方法，而较少关注对原核转录物的分析。这次第3版中最值得注意的是，新增加了若干如何改进商用RTPCR的诀窍，改良了的5′RACE、3′RACE、差减PCR方法和优化了的互补DNA(cDNA)合成方法，以及那些富含信息量讨论RNA干扰(RNAi)、微阵列和生物信息学这些新技术的章节。考虑到目前对测定细胞内特定转录物的绝对丰度的空前兴趣，上述这些方法就显得尤为重要。显然，本书聚焦于以RNA为基因表达参数进行的研究，并着重于这些技术的独立运用，或是如何与其他试验相结合，对真核基因表达的转录和转录后调控进行研究。在此，我可以提供的最好的忠告是：在实验时总是多想两步，再想想选用的RNA分离方法是不是会对后面的实验程序和最终的数据解释造成影响。
本书是为独立研究者(译者注：一般指课题组长)、实验科学家、内科医生、兽医师、实验技术员、研究生以及其他任何可能用到基础研究技术的人员编写的。本书有意帮助从新手到熟练的处于各种水平的研究人员，提供在抉择的过程中可遵循的基本原理和切实可行的权宜之策。很多注释和提示都是基于个人的经验，为如何更好地从生物材料，特别是那些富含核糖核酸酶的材料中得到RNA而铺路。研究起始时，如果认识不清楚要研究什么和如何进行研究，就会导致RNA策略
设计上的缺陷，只能日复一日地造成生物材料的浪费。尽管本书不可能全面论及基因表达的所有基本原理，但如何正确操作和试验RNA，确实是反复出现的主题。本书也清楚地论证了每一种特定技术是如何配合到核酸研究的总体框架中去的。虽然我希望读者能从头到尾研究本书中的内容，但也可以跳跃选择其中的一些实验方案，而不拘泥于其连贯性。对于那些刚开始从RNA分析的观点来研究细胞生物化学的读者而言，先读一下第26章(一个RNA范例)可能会有所帮助。
总而言之，全书的所有章节共同构成RNA这个特写。各章都各自提供了一个明确的主题。插入流程图、图表等以促进学习以及帮助研究规划和项目的执行。研究者仅受他们自己灵活性的限制。
我衷心感谢很多给以理性鼓励和各种方式支持本书写作的同事和朋友。对我家庭的支持和耐心也表示公开感谢。
（金由辛译；金言校）
第1章RNA与细胞生物学
11为什么研究RNA
12RNA是什么
13多核苷酸的合成
14RNA的种类
15严谨度—......
其他说明
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北京朝阳区
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