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现代发酵微生物实验技术
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现代发酵微生物实验技术

编    号: 90881
著 作 者: 诸葛健 主编
出 版 社: 化学工业出版社
书    号: 9787502566531
出版日期: 2005-4-1
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现代发酵微生物实验技术   现代发酵微生物实验技术
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内容简介
本书是江南大学(原无锡轻工大学)生物工程学院工业微生物研究中心的集体创作,作者所在的发酵工程学科是我国最早授予的国家重点学科之一,参与编写者在教学与科研上都有较为丰富的实践经验和研究成果。全书共分七章,内容主要涉及显微技术、微生物细胞特殊结构的观察、噬菌体、标记菌种的获得与应用、原生质体系列育种技术、基因工程育种技术和固定化细胞生物转化等计81项实验。 本书的编写有其特色,不仅图文并茂,而且有论述,有操作,有结果,还有某些新设备的介绍,特别是书中有关基因操作的技术内容,是与同类微生物实验技术书相比的新颖之处。适合高等院校微生物学、发酵工程、生物工程、食品工程等专业的高年级本科生及研究生使用,也可供相关科研人员参考。目录 第一章显微技术1 第一节显微观察1 一、相差显微镜1 【实验11】相差显微镜的使用2 二、荧光显微镜5 【实验12】荧光显微镜的使用8 三、电子显微镜8 【实验13】细菌、酵母菌超薄切片的透射电镜观察12 【实验14】噬菌体的透射电镜观察14 【实验15】质粒dna的透射电镜观察15 【实验16】酵母细胞的扫描电镜观察18 第二节显微摄影20 【实验17】显微摄影、菌落摄影和凝胶摄影21 第三节放射自显影25 【实验18】硝酸纤维素滤纸上标记dna的放射自显影25 第四节显微操作技术用于单细胞分离27 【实验19】显微操纵仪用于单细胞分离29 【实验110】显微操纵仪用于酵母子囊的解剖及子囊孢子单孢化30 【实验111】玻璃微型工具的制作31 第二章微生物细胞特殊结构的观察33 第一节染色技术33 一、染色的基本原理33 二、染料34 三、染色36 【实验21】真菌的荧光染色与观察36 第二节细胞主要结构成分的分离与观察38 【实验22】革兰阳性细菌细胞壁的制备39 【实验23】酵母细胞壁甘露聚糖的制备41 【实验24】细胞壁的形态观察42 【实验25】革兰阴性菌细胞外膜蛋白的分离43 【实验26】细菌荚膜的观察44 【实验27】细菌鞭毛的观察45 【实验28】微生物细胞核的观察47 【实验29】细菌染色体dna的分离与观察49 【实验210】异染颗粒的观察51 【实验211】酵母细胞内脂肪颗粒和肝糖颗粒的观察52 【实验212】酵母液泡及线粒体的提取54 第三节芽孢、子囊孢子和假菌丝的观察57 一、芽孢57 【实验213】细菌芽孢形成及发芽的观察59 【实验214】伴孢晶体的观察60 二、酵母子囊孢子61 【实验215】酵母子囊孢子的形成及观察63 【实验216】酵母单倍体的分离与鉴定64 三、酵母假菌丝66 【实验217】酵母假菌丝的观察66 第三章噬菌体69 【实验31】噬菌体的分离与纯化72 【实验32】高效价噬菌体原液的制备74 【实验33】溶源菌的鉴定75 【实验34】抗噬菌体产α淀粉酶菌株的选育77 第四章标记菌种的获得与应用79 第一节富集培养技术在获得标记菌种中的应用79 一、营养缺陷型富集法在原核细胞中的应用79 二、营养缺陷型富集法在真核细胞中的应用81 三、浓度梯度法富集抗性突变株82 四、富集法在研究次级代谢的重组dna技术中的应用84 第二节营养缺陷型标记菌种的获得84 一、诱变方法85 二、淘汰野生型85 三、检出缺陷型85 四、营养缺陷型生长谱的确定87 【实验41】芽孢杆菌营养缺陷型的筛选89 【实验42】酵母营养缺陷型的筛选91 【实验43】青霉菌营养缺陷型菌株的筛选92 第三节呼吸缺陷型标记菌种的获得94 【实验44】酵母呼吸缺陷型的筛选94 第四节抗反馈调节抗性突变株的获得与应用95 【实验45】氨基酸抗反馈调节突变株的选育98 第五章原生质体系列育种技术101 第一节工业菌种育种的策略101 第二节原生质体融合育种102 一、原生质体融合育种的特点103 二、原生质体融合育种步骤与要点107 三、原生质体再生率和融合率的计算115 【实验51】芽孢杆菌的原生质体融合115 【实验52】链霉菌原生质体融合119 【实验53】小单胞菌的原生质体融合124 【实验54】酿酒酵母的原生质体融合125 【实验55】丝状真菌的原生质体融合128 第三节原生质体转化育种134 【实验56】芽孢杆菌原生质体转化134 【实验57】质粒dna转化链霉菌原生质体137 【实验58】酿酒酵母的原生质体转化法138 【实验59】真菌原生质体转化139 第四节原生质体诱变育种141 【实验510】芽孢杆菌种间融合子f262原生质体诱变育种142 【实验511】紫外线诱变原生质体选育l谷氨酸高产菌143 第五节原生质体技术中的一些特殊技术145 一、紫外线照射原生质体增加融合率145 二、供体原生质体的热灭活146 三、原生质体电融合技术147 【实验512】电诱导酵母原生质体融合147 四、遗传转移148 【实验513】原生质体融合法转移酵母线粒体及杀伤质粒148 第六章基因工程育种技术151 第一节基因工程的基本过程和原理151 一、载体152 二、dna重组用酶154 三、宿主细胞155 四、外源dna156 第二节大肠杆菌基因工程160 一、大肠杆菌感受态细胞的制备和转化160 【实验61】用氯化钙制备和转化感受态大肠杆菌(ⅰ)161 【实验62】用氯化钙制备感受态大肠杆菌(ⅱ)162 【实验63】用peg制备和转化大肠杆菌感受态细胞163 【实验64】大肠杆菌的电击转化164 二、大肠杆菌中质粒的提取与纯化166 【实验65】质粒的大量提取与纯化166 【实验66】质粒的小量提取168 【实验67】用硅胶膜分离法小量提取质粒169 三、微生物染色体dna的提取与pcr扩增170 【实验68】枯草杆菌染色体dna的提取170 【实验69】真菌染色体dna的简易提取方法171 【实验610】枯草杆菌淀粉酶基因的pcr扩增173 【实验611】从电泳凝胶中分离枯草杆菌淀粉酶基因174 四、外源基因在大肠杆菌中的高表达175 【实验612】载体和基因的酶切180 【实验613】基因与载体的连接180 第三节非大肠杆菌微生物基因工程184 一、芽孢杆菌基因工程185 【实验614】枯草杆菌感受态细胞的制备和转化186 【实验615】地衣芽孢杆菌感受态细胞的诱导形成及其高效电转化187 【实验616】枯草杆菌转化子质粒的提取和检测188 【实验617】高碱性蛋白酶基因多拷贝重组菌的构建190 二、酵母基因工程194 【实验618】酵母染色体dna的提取196 【实验619】酿酒酵母的乙酸锂完整细胞转化法197 【实验620】单链载体dna的制备198 【实验621】酵母菌质粒dna的提取199 【实验622】巴斯德毕赤酵母的电转化方法200 【实验623】羟酸还原异构酶基因多拷贝重组啤酒酵母的构建201 第七章微生物细胞固定化方法205 第一节载体结合法206 一、表面吸附法206 二、共价结合法207 第二节交联法208 第三节包埋法208 一、海藻酸钙凝胶包埋法209 【实验71】酿酒酵母的海藻酸钙固定化211 【实验72】固定化枯草杆菌连续生产耐热α淀粉酶213 二、κ角叉胶包埋法215 【实验73】κ角叉胶一步包埋法215 【实验74】κ角叉胶二步包埋法217 【实验75】固定化酵母连续生产酒精218 【实验76】固定化细胞的回收与活细胞计数219 三、聚丙烯酰胺凝胶包埋法219 【实验77】大肠杆菌的聚丙烯酰胺凝胶固定化220 四、光交联树脂前聚体包埋法221 【实验78】光交联树脂固定化原生质体221 五、其他载体包埋方法222 第四节几种固定化细胞方法联用224 一、包埋交联法224 二、吸附交联法225 三、包埋吸附法225 第五节其他固定化方法225 第六节固定化微生物细胞方法的选择226 一、固定化微生物细胞方法的选择226 二、固定化细胞技术的评价指标227 第七节微生物细胞固定化技术前景展望227 主要参考文献229
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其他说明
开本:小16开 版次:1-1 装帧:平膜 字数:257000

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西安

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